肠道内容物氨浓度的测定
1测定原理
碘化汞和碘化钾的碱性溶液与氨反应可生成淡红棕色胶态化合物，此颜色在较宽的波长内具有强烈吸收。一般可在425纳米比色定量。
2主要材料与试剂 2.1无氨水
每升蒸馏水中加入0.1ml硫酸，在全玻璃蒸馏器中重蒸馏，弃去50ml初馏液，接取其余馏出液于具塞磨口的玻璃瓶中，密塞保存。
2.2硼酸吸收液
称取20g硼酸溶于水，稀释至1L。
2.3纳氏试剂
称取40g氢氧化钠，溶于125ml水中，充分冷却至室温。另称取17.5g碘化钾和25g碘化汞溶于水，然后将此溶液在搅拌下徐徐注入氢氧化钠溶液中，用水稀释至250ml，贮于聚乙烯瓶中，密塞保存。
2.4酒石酸钾钠溶液
称取250g酒石酸钾钠溶于500ml水中，加热煮沸以除去氨，放冷，定容至500ml。
2.5氨标准使用液
称取3.819g经100℃干燥过的优级纯氯化铵溶于水中，移入1000ml容量瓶中，稀
释至标线。此溶液为氨标准贮备液，每毫升含1.00mg氨氮。移取5.00ml氨标准贮备液于500ml容量瓶中，用水稀释至标线。此溶液每毫升含0.010mg氨氮。
3主要仪器
半自动凯氏定氮仪（LNK-871型）
分光光度计（722型）
4操作步骤 4.1校准曲线的绘制
吸取0、0.50、1.00、3.00、5.00、7.00和10.0ml氨标准使用液于50ml容量瓶中，加1.0ml酒石酸钾钠溶液，混匀，加水至标线。加1.5ml纳氏试剂混匀。放置10分钟后，在波长420nm处测定吸光度。由测得的吸光度，减去零浓度空白的吸光度后，得到校正吸光度，绘制以氨氮含量对校正吸光度的校准曲线。
4.2样品的蒸馏
称取适量的回肠（或盲肠）内容物，加水稀释至100ml，搅拌均匀后移入三角瓶中。加数滴溴百里酚蓝指示液，用氢氧化钠或盐酸溶液调节pH值至7.0左右，加入0.25g轻质氧化镁，立即接在半自动凯氏定氮仪上加热蒸馏，至馏出液达100ml时，停止蒸馏。
4.3样品的测定
分取适量经蒸馏预处理后的馏出液，加入50ml容量瓶中，稀释至标线，加1.0ml酒石酸钾钠溶液。以下同校准曲线的绘制，测定吸光度。
5结果计算
氨浓度由标准曲线查得的氨含量肠道内容物重