原药材检验标准操作规程
紫草检验标准操作规程 执行日期 审核 批准 部门 姓名 签名 日期 起草 质量控制部 分发部门 质量控制部 质量保证部 生产制造部 质量负责人 质量控制部、质量保证部 目 的： 建立一个中药饮片原药材检验标准操作程序，确保检验结果准确可靠。
适用范围：中药原药材。
责 任 人：质量保证部主任、质量控制部主任、化验员。
标准来源：《中华人民共和国药典》2010年版一部、《安徽省中药饮片炮制规范》。
内 容： 1、性状
取本品适量，放入白瓷盘中，用眼观察，可见以下性状特征：
紫草（软紫草） 呈不规则的长圆柱形，多扭曲，长7~20cm，直径1~2.5cm。表面紫红色或紫褐色，皮部疏松，呈条形片状，常10余层重叠，易剥落。顶端有的可见分歧的茎残基。体轻，质松软，易折断，断面不整齐，木部较小，黄白色或黄色。气特异，味微苦、涩。
内蒙紫草 呈圆锥形或圆柱形，扭曲，长6~20cm，直径0.5~4cm。根头部略粗大，顶端有残茎1或多个，被短硬毛。表面紫红色或暗紫色，皮部略薄，常数层相叠，易剥离。质硬而脆，易折断，断面较整齐，皮部紫红色，木部较小，黄白色。气特异，味涩。
2鉴别
主要使用仪器：电子分析天平、电子显微镜等。 2.1显微鉴别：
2.1.1 试液配制
2.1.1.1 水合氯醛试液：取水合氯醛50克，加水15毫升与甘油10毫升使溶解，即得。
2.1.1.2 甘油醋酸试液：取甘油、醋酸及水各等份混匀，即得。
2.1.1.3 稀甘油：取甘油33毫升，加水稀释至100毫升，再加樟脑一小块或液化苯酚1滴，即得。
2.1.2 供试品制备
2.1.2.1 取本品10g，研细后取少量粉末，置载玻片上，滴加水合氯醛搅拌均匀 ，置酒精灯上加热透化；加稀甘油数滴， 搅拌均匀，分装2~3片，加盖玻片，即得。
2.1.2.2 取研细的粉末少量置载玻片上，加甘油醋酸试液，搅拌均匀，加盖玻片，即得。
2.1.2.3取研细后取少量粉末，置载玻片上，滴加水搅拌均匀，同时滴加少许稀甘油，加盖玻片，即得。
2.1.3 置显微镜下观察
粉末深紫红色。非腺毛单细胞，直径13~56μm，基部膨大成喇叭状，壁具纵细条纹，有的胞腔内含紫红色色素。栓化细胞红棕色，表面观呈多角形或圆多角形，含紫红色色素。薄壁细胞较多，淡棕色或无色，大多充满紫红色色素。导管主为网纹导管，少有具缘纹孔导管，直径7~110μm。
2.2薄层鉴别
取本品粉末0.5g，加石油醚（60~90℃）20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液浓缩至约1ml，作为供试品溶液。另取紫草对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（《中华人民共和国药典》附录ⅥB）试验，吸取上述两种溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-甲苯-乙酸乙酯-甲酸（5：5：0.5：0.1）为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的紫红色斑点；再喷以10氢氧化钾甲醇溶液，斑点变为蓝色。
3、检查
主要使用仪器：电子分析天平、电热恒温干燥箱等。
3.1 水分
取供试品2-5g，平铺于干燥至恒重的扁形称量瓶中厚度不超过10mm，精密称定，打开瓶盖在100~105℃干燥5小时，将瓶盖盖好，移置干燥器中，冷却30分钟，精密称定，再在上述温度干燥1小时，冷却，称重，至连续两次称重的差异不超过5mg为止。根据减失的重量，按下式计算即得。 W2－W3
供试品中的含水量（%）＝──────×100％ W2－W W 称量瓶重（g）
W2 烘前称量瓶和样品重之和（g） W3 烘后称量瓶和样品重之和（g） 本品含水量不得过 15.0% 。 3.2二氧化硫残留量
按中国药典2010 年版第一增补本附录二氧化硫残留量测定法测定，取本品细粉10g，精密称定，置于两颈圆底烧瓶中，加水300ml—400 ml（应加水至没过氮气导气管的下端），取6mol/L盐酸10ml加入带刻度的分液漏斗中连接分液漏斗，并导入氮气至瓶底，。锥形瓶内加水125ml和淀粉指示液1 ml作为吸收液，置于磁力搅拌器上不断搅拌。连接回流冷凝管，在冷凝管上部连接导气管，将导气管插入250ml锥形瓶底部，开通氮气，调节氮气流量为0.2L/min，打开带刻度的分液漏斗的活塞，使盐酸流入烧瓶。加热圆底烧瓶内的溶液至沸，并保持微沸约3分钟后开始用0.01mol/l, 的碘滴定液滴定，吸收液置于磁力搅拌器上不断搅拌，至吸收液显蓝色或蓝紫色，持续30秒不消失，并将滴定的结果用空白校正，每1毫升的碘滴定液(0.01mol/l)相当于0.06mg的二氧化硫。
本品二氧化硫量不得过150mg/kg。
4、含量测定
主要使用仪器：电子分析天平、高效液相色谱仪等。
4.1羟基萘醌总色素 取本品适量，于50℃干燥3小时，粉碎（过三号筛），精密称取0.5g，置100ml量瓶中，加乙醇至刻度，4小时内时时振摇，滤过。精
密量取续滤液5ml，置25ml量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀。照紫外-可见分光光度法（《中华人民共和国药典》附录ⅤA），在516nm波长处测定吸光度，按左旋紫草素（C16H16O5）的吸收系数（E1cm1%）为242计算，即得。
本品含羟基萘醌总色素以左旋紫草素（C16H16O5）计，不得少于0.80%。 4.2β，β′-二甲基丙烯酰阿卡宁照高效液相色谱法（《中华人民共和国药典》附录ⅥD）测定。
4.3色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合胶为填充剂；乙腈-水-甲酸（700：300：0.5）为流动相；检测波长为275nm。理论板数按β，β′-二甲基丙烯酰阿卡宁峰计算应不低于2000。
4.4对照品溶液的制备 精密称取β，β′-二甲基丙烯酰阿卡宁对照品适量，加乙醇制成每1ml含0.10mg 的溶液，即得 。
4.5供试品溶液的制备 取本品粉末（过四号筛）约0.5g ，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入石油醚（60~90℃）25ml，称定重量，超声处理（功率250W，频率33kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用石油醚（60~90℃）补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液10ml，蒸干，残渣用流动相溶解并转移至10ml量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，即得。
4.6测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品以干燥品按下式计算即得： Ax×CR×Vx
供试品的含量（％）＝────────——×100％ AR×G×（1－W）×103 Ax 供试品的峰面积或峰高。 Vx 供试品的体积(ml) CR 对照品的浓度
AR 对照品的峰面积或峰高 G 供试品的重量(g) W 供试品的含水量(%)
本品含β，β′-二甲基丙烯酰阿卡宁（C21H2206） ，不得少于0.30 ％。